1、卵子冷冻的存活率、受精率、卵裂率、种植率和妊娠率卵子是人体的细胞，体表面积和体积比较小，卵母细胞中含有大量水分，从而使卵子在冷冻过程中脱水不充分，冷冻保护剂渗透性差；现在大部分生殖中心冷冻为成熟期MⅡ卵子，此时卵子是处在减数分裂的中期，在细胞膜下有大量皮质颗粒分布，纺锤体已经形成，对理化因素是非常敏感的。近几年来由于玻璃化冷冻技术应用，使得卵子复苏率、患者的妊娠率都有较大的提高。本中心自2011年开展卵子冷冻技术并获得妊娠，本研究中冷冻卵子并复苏33周期，存活率约94.2%，种植率约31.8%，解冻周期的妊娠率约51.5%，移植周期的妊娠率约54.8%，高于国内外报道。

2、解冻卵子后不同培养时间行ICSI对患者妊娠结局的影响卵子冷冻后卵子纺锤体消失，解冻后纺锤体重组，但需要培养多长时间行ICSI有较好妊娠结局。有报道卵子纺锤体修复和恢复至少需要3h，对玻璃化冷冻和慢速冷冻进行比较，纺锤体恢复要等3h后。故本研究就解冻卵子培养3h或4h行ICSI进行比较，结果显示在卵子复苏率、受精率、卵裂率、种植率和移植周期妊娠率差异均无统计学意义（P＞0.05），但2PN受精率、2PN卵裂率差异有统计学意义（ρ＜0.05）。在B组异常受精率较高约为12.3%，本中心2014年新鲜ICSI周期异常受精率约为5.0%（416/8316），而A组约为3.5%，和新鲜ICSI周期相似。这些数据提示卵子解冻后纺锤体和细胞器如线粒体等功能恢复和稳定是否需要培养一定的时间，有报道采用共聚焦显微镜观察复温后人卵母细胞，＞60%卵母细胞纺锤体在复温后2h重新出现，所以目前部分生殖中心采用卵子复温2h行ICSI，但妊娠率、种植率偏低。卵子解冻时间短可能影响了线粒体、纺锤体功能恢复，一方面使同源染色体不分离或异常分离，影响雌雄原核的迁移，使1PN和3PN比例增加，从而影响了2PN的比率；另一方面卵子线粒体功能的变化，胚胎卵裂率低以及胚胎发育受阻，导致胚胎发育的异常、阻滞。在B组解冻卵子后培养3h行ICSI，1例解冻4卵，存活4卵，受精3枚2PN3，但受精后第2、3天均未卵裂；另1例培养3h15min行ICSI，解冻4卵，存活2卵，受精2PN2个，卵裂1个。以上2例均为卵子解冻后培养＜3.5h，由于胚胎没卵裂和胚胎质量差无胚胎移植，故2例均未ET。但B组种植率约40.9%，较A组种植率约27.3%高，虽然A、B两组差异无统计学意义，但种植率有增高的趋势，是否A组有卵子老化可能；因为ICSI是一个过程，需要一定时间，尤其是严重少弱精、附睾和睾丸精子，ICSI操作时间较长，故认为解冻卵子后培养接近4h即3.5h～4h行ICSI可能有较好的妊娠结局；并尽可能快的完成ICSI过程，避免解冻后培养时间过长卵子老化而使种植率偏低，同时避免培养时间过短而造成的异常受精率较高和卵裂率偏低等。由于样本量小，需要以后加大样本量进一步加以证实。