摘要：为了充分发挥和提高优良种公羊的利用率，提高绵羊冻融精液品质，试验采用酶动力学分光光度法对冷冻保存前后小尾寒羊精子和精清中ATP酶活性变化进行研究。

精液的冷冻与保存：将平衡好的精液细管置于自制冷冻漂浮器上(距离液氮表面2.0～2.5cm，温度在－110～－80℃)熏蒸10min，投入液氮保存。

精液的解冻：从液氮罐中取出精液细管，迅速浸入39～40℃水浴中，轻轻摇动直至融化(10～15s)。

精子活率的评定：将稀释精液摇匀后，取中层精液10μL滴于经37℃恒温板等温预热的载玻片上，盖片后置于显微镜下放大400倍检查精子1000个以上，分别计算呈直线运动精子数和总精子数，计算精子活率。

精子在冷冻保存过程中经历了与冷冻剂相互作用、降温冷冻、超低温贮存和解冻复温的过程，这些过程中的物理和化学效应(pH值、渗透压的变化，冰晶的形成等)都有可能使精子受到损伤，导致ATP酶活性受到影响。

冷冻保存对精子结构和功能有可能造成了损伤。

因为：1.冷冻过程中冰晶的形成和细胞内外渗透压的改变导致精子膜的损伤，精子膜中的类脂蛋白从细胞结构中分离，使细胞膜原有空间构象发生改变，精细胞中的酶释放到精清中；2.内源性精子类脂过氧化反应能造成精子膜的严重损伤，导致细胞内容物的释放，外源性脂肪酸过氧化物亦可损伤精子膜，造成同样的细胞内酶的释放，这与陈田飞等的研究结果一致。