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血管温度的调控

作者:液氮罐 日期:2018/1/2 9:41:48 信息来源:http://www.tcyedanguan.com/

生物组织低温损伤主要发生在0~-60℃的温度区间,采用恒定降温速率将血管降温至-80℃左右,即可转移至液氮中保存。降温或复温速率不当,均会导致血管损伤。采用较慢的降温速率将缩小降温过程中血管组织中的温度梯度,使血管壁内部温度分布均匀,减小热应力。Pegg等在人内皮细胞株ECV304的低温保存实验中,发现以0.3,1.0和10℃/min速率降温,细胞存活率达到45%~50%,50℃/min,存活率约为20%。复温模式分快速和慢速两种,慢速复温常分步进行,先将标本置于室温下30min,再放入37或40℃水浴中,这样可以避免再结晶的发生,减小细胞损伤,保持血管壁完整性。快速复温是将标本直接放入37或40℃水浴中。Rendal等在对猪主动脉的实验研究中发现,在相同的降温模式下,以较慢的复温速率(15℃/min)复温的效果要显著好于较快的复温速率(100℃/min)。因为缓慢的复温速率,能使血管组织各部有充足的时间进行热传导,减小温度梯度,降低热应力,进而减少血管壁的机械损伤。
血管标本降温至-80℃左右,和造血干细胞、早期胚胎一样,需要保存于-196℃的液氮溶液或-150℃的液氮蒸汽中。目前的研究更倾向于在液氮蒸汽中保存,可以减小标本遭受污染的风险。Rendal研究发现在猪动脉内弹力层和构成血管壁的其他弹力层的保护方面,液氮蒸汽优于液氮。它的弊端在于需要经常添加液氮,不管是人工还是自动,都有可能使标本浸入液氮,造成急速降温的风险。
深低温冻存血管的抗原性:目前深低温冻存血管的抗原性是否改变尚不能确定。魏民等在对兔股动脉的实验研究中发现:与新鲜血管相比,深低温冻存血管移植后受体总体免疫反应减弱。Solanes等进行的猪动脉移植实验中,移植后3个月发现与新鲜血管相比,深低温冻存血管内膜中CD3+细胞或T淋巴细胞计数明显减少,环孢素A处理组定时服用环孢素A15~20mg/(kg·d)减少更显著;另外,环孢素A处理组移植后通畅率显著提高。在这项研究中还发现:新鲜血管移植后出现类似于急性排斥反应的病理学表现,而深低温冻存血管呈现类似于慢性排斥反应的改变。Saito等的实验得出了不同的结论,他们将LEW系大鼠的新鲜及冻存动脉分别移植给同系及BN系大鼠,术后7,28d,将供、受体脾细胞进行混合淋巴细胞反应,结果显示同系间供受体脾细胞未发生免疫反应,而异基因大鼠间则发生免疫反应,而且新鲜动脉移植组与冻存动脉移植组间免疫反应强度无显著差别。
Pasquinelli等的研究发现人股动脉和胸主动脉在低温冻存后,内皮细胞的HLA-Ⅰ抗原表达与新鲜标本无差异,认为低温损伤使血管中抗原表达细胞减少,而其本身的抗原性并未改变。
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